| 報告時間：2023-12-15 |
| 報告地點：407視聽教室 |
| 指導老師： 唐品琦 |
| 學生：柯淳皓 |
| 摘要 |
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小鼠始基生殖細胞（primordial germ cells, PGCs）為生殖細胞之先驅細胞，於7.25天（E7.25）胚胎近端後側之胚外中胚層，受到胚外組織訊息誘導而形成，並自胚胎後側移動至生殖脊（genital ridge）中發育成熟。轉錄因子Blimp1基因最早表現於E6.25天之先驅PGCs，可抑制先驅PGCs中體細胞相關基因之表現，並提高PGCs相關基因之表現。Naïve小鼠胚幹細胞（mouse embryonic stem cells, mESCs）可於體外藉由細胞激素（cytokines）之誘導，特化形成類始基生殖細胞（PGC-like cells, PGCLCs），且過程中間需經過一段formative階段之類上胚層細胞（Epiblast-like cells, EpiLCs），然而此體外分化方式所能獲得具備發育至成熟生殖細胞能力之PGCLCs數量不多，因此，本研究目的為將誘導型Blimp1表現載體，轉染至綠螢光mESCs（GFP-mESC）中，藉由適時誘導Blimp1表現以期可改善此細胞株（GFP-mESC-blimp1）於體外分化產製PGCLCs之效率。結果顯示，PGCLCs特化過程中，誘導Blimp1過度表現可提高PGC相關基因之轉錄，尤其是PGC特化基因Stella之表現受到Blimp1之誘導，顯著提升其表現量，且第四天之形成之PGCLCs細胞團亦有較高之多能性相關基因表現。此外，誘導表現Blimp1後第一天，Ap2r與內源性Blimp1之表現亦上升，且過度表現Blimp1之PGCLCs細胞團中，有較多之細胞表現PGCs特化相關膜上蛋白，MVH與SSEA1，顯示Blimp1過度表現有助於提升PGCLCs體外分化系統之效率。然而將產製之PGCLCs細胞團，注射至經白消安（bufulfan）處理後缺乏生殖細胞之小鼠睪丸輸出小管內，經過60天之體內分化，卻沒有發現成熟之精子形成。綜上所述，藉由短暫誘導表現Blimp1對於體外細胞激素分化EpiLCs形成PGCLCs之系統，可改善PGCLCs分化效率。 |
| 參考文獻 |
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